В 1744 году Оренбург стал центром вновь образованной губернии. В инструкции Сената от 15 марта говорилось: «...быть в Оренбурге губернии и именоваться Оренбургская губерния и в ней губернатором тайному советнику Неплюеву». В ведении губернатора были все новопостроенные крепости по пограничной линии, Исетская провинция «с зауральскими башкирами», Уфимская провинция «со всеми башкир­скими делами». «Ему же, губернатору,— отмечалось в инструкции,— ведать и киргиз-кайсацкий народ, и та­мошние пограничные дела». Вскоре в ведение оренбург­ского губернатора поступили также ставропольские кре­щеные калмыки и Яицкое казачье войско. Как показы­вает «Карта генеральная Оренбургской губернии и смеж­ных с нею мест», составленная в 1755 году «при оренбург­ских географических делах», граница губернии доходила на севере до рек Исети и Камы, на западе у Самары и Ставрополя — до Волги, шла несколько западнее реки Яик в нижнем ее течении, на юге доходила до Каспий­ского и Аральского морей, на востоке — до реки Тобол и восточных пределов территории кочевий Средней казах­ской Орды.

В Оренбурге находились губернатор, его канцелярия, другие учреждения. Первым оренбургским губернатором стал И. И. Неплюев, занимавший этот пост с 1744 по 1758 год. В своей деятельности этот энергичный и даль­новидный правитель основное внимание уделял военно-политическому и хозяйственному развитию обширного и тогда еще слабо освоенного края.